recomWell HPV 16/18/45

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Los virus del papiloma humano (VPH) son virus de transmisión sexual que ocurren con frecuencia en todo el mundo. Casi todas las personas entran en contacto con al menos un virus HP durante el curso de su vida. En la mayoría de los casos, la infección se cura por sí sola. En casos raros, las infecciones persistentes crónicas pueden causar problemas de salud. Hasta el momento se conocen más de 200 tipos de virus, de los cuales aproximadamente 40 afectan a los genitales. Algunos de estos virus son responsables de la formación de verrugas genitales benignas, mientras que otros tipos, los llamados tipos de alto riesgo, contribuyen significativamente al desarrollo de carcinoma cervical, anal y de pene y cáncer en el área de la boca y la garganta. Los tipos de VPH de alto riesgo 16 y 18 se encuentran en el 70% de los casos de cáncer de cuello uterino. A menudo, se analiza una muestra de hisopo citológico para detectar cambios celulares como parte de la detección anual de cáncer de cuello uterino. Las pruebas de ácido nucleico del VPH de alta sensibilidad se utilizan cada vez más, pero la especificidad de estas pruebas es limitada con respecto a la detección de lesiones.

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RUO (research use only), Sólo con fines de investigación. No usarse en procedimientos diagnósticos.

POSIBLE USO DE RECOMWELL HPV 16/18/45 Y LA RELEVANCIA DE E7

Debido a la importancia diagnóstica de E7, el nuevo recomWell HPV 16/18/45 se puede utilizar como una prueba adicional útil para tomar otras medidas terapéuticas o diagnósticas.

USOS
VENTAJAS DEL PRODUCTO
  • Valor predictivo negativo (VPN) muy alto > 97 %
  • Mayor valor predictivo positivo (PPV) que las pruebas HPV-NAT
  • Apoyo a la toma de decisiones para otras medidas diagnósticas y terapéuticas
  • El punto de corte clínico se valida sobre la base de 1574 muestras de cuello uterino caracterizadas
  • Resultados claros y cualitativos basados ​​en la medición de absorbancias
  • Separaciones: procesamiento de hasta 96 muestras individuales por ejecución posible
  • Reactivos listos para usar, posibilidad de automatización
SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD PPV Y NPV

Sensibilidad diagnóstica, especificidad diagnóstica, valor predictivo positivo (PPV) y valor predictivo negativo (NP

Los datos de rendimiento de la sensibilidad para las etapas de la enfermedad correspondientes se generaron analizando muestras positivas para hrHPV16 o hrHPV18 (según lo determinado por HPV-NAT). La especificidad de las diferentes etapas de la enfermedad se definió como el cociente de los resultados negativos de la prueba E7 obtenidos dividido por el número total correspondiente de muestras negativas verdaderas ("libres de enfermedad").

TODO
  • *CIN: neoplasia intraepitelial cervical.
  • **CIS: carcinoma in situ
  • ***CxCa: carcinoma de cuello uterino.
PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS DE PACIENTES
PREPARA

  • Preparación de la muestra.

  • Antes de realizar el recomWell HPV 16/18/45, los frotis cervicales (almacenados en solución ThinPrep® PreservCyt) se procesan de la siguiente manera:

    Lavar 4 veces.

  • CENTRIFUGACIÓN Transfiera 15 ml de material de muestra a un tubo con tapón de rosca y fondo cónico centrifugar durante 15 minutos a 600 g. Retire con cuidado el exceso de sobrenadante. 
  • INCUBACIÓN Añada 500 µl de tampón de lisis A, agite e incube durante 30 minutos a temperatura ambiente. Añadir 500 µl de tampón de lisis B y agitar en vórtice.
PRINCIPIO DE PRUEBA Y PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO

  • Prueba de sándwich indirecto. Los anticuerpos monoclonales de conejo anti-HPV 16 E7, 18 E7 y 45 E7 se fijan en los pocillos de una placa de microtitulación.
  • 1ra incubación Agregue la muestra del paciente preparada e incube durante 1 hora a temperatura ambiente.     Lavar 3 veces.

  • 2da incubación Agregue el anticuerpo secundario anti-VPH E7 listo para usar e incube durante 1 hora a Temperatura ambiente.  Lavar 3 veces.
  • 3ra incubación Agregue el conjugado de estreptavidina listo para usar e incube durante 1 hora a temperatura ambiente.  Lavar 6 veces.
  • Reacción de color Agregue solución de TMB lista para usar e incube 30 minutos a temperatura ambiente. Detenga la solución de sustrato con H3PO4 y mida la absorbencia a 450 nm.
  • Tiempo de vuelta: aprox. 4 horas.
ALMACENAMIENTO

+2°C - +8°C